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染色涂片的制備步驟
源葉生物 / 2015-05-08

在干凈的玻片上,將固體培養基上生長的細菌按照以下方法制作涂片:

(1) 用蠟筆將玻片分成幾部分,每部分涂一個菌。

(2) 每部分用接種環加少量的無菌水。

(3) 垂直拿住接種環在酒精燈外焰上加熱直到整個接種絲燒紅。

(4) 等待接種環冷卻。

(5) 像拿筆一樣握住接種環,沾取少量菌株,注意避免沾到瓊脂,

(6) 將菌株轉移到玻片的水滴上,用接種環平面乳化后將其在劃分的區域內涂抹均 勻。注意要涂抹得又薄又勻,但也要避免涂抹得太薄以至于干燥后無法觀察。單個菌落 在顯微鏡下容易觀察。如果菌株沒冇均勻的涂抹開,而是聚在一起,應該棄置,重新涂片。

(7)將接種環滅菌。

(8)用同樣的方式制備其他涂片。

(9)玻片在空氣中晾干,在酒精燈火焰上快速過兩次使細胞凝結并牢固地固定在玻片上

涂抹液體培養基中的細菌涂片應采用同樣的方法,只是不需要準備稀釋液。培養基 中成分和雜質的存在會造成涂片不干凈。如果液體培養基中含糖量較髙(如乳酸菌培養 基),在固定玻片時要適當延長加熱時間,避免在沖冼玻片時因糖的溶解而將細菌沖洗掉。

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